MYKOLOGICKÁ DIAGNOSTIKA

Mykózy jsou skupinou infekčních onemocnění způsobených jak vláknitými houbami, tak kvasinkovitými houbami. Tyto organismy nejčastěji napadají kůži, drápy, ale také sliznice či vnitřní orgány.

Éra nadužívání antibiotik a steroidů je jedním z nejdůležitějších faktorů predisponujících k infekcím, ale mykóza se může objevit také jako následek závažných onemocnění vedoucích k potlačení imunitního systému.

Zjistěte více o našich vyšetřeních, abyste mohli pacienta přesně diagnostikovat.

ZVÍŘATA V ZÁJMOVÉM CHOVUKONĚ

fot. Anna Bogucka

MYKOLOGICKÁ DIAGNOSTIKA

Zvířata v zájmovém chovu

KVASINKOVÉ HOUBY

Materiál

  • výtěr na agaru z rány, nosu, ústní dutiny, oka, zvukovodu
  • moč (pouze odebraná cystocentézou)
  • tělní tekutiny (tekutina z pleury, tekutina z pobřišnice, kloubní tekutina)
  • výplachy dýchacích cest
  • čerstvá stolice

Poznámky

Pro diagnostiku je nejvhodnější materiál odebraný před podáním léků, zejména těch s místním účinkem. Pokud již byla zahájena léčba, materiál je potřeba odebrat před podáním další dávky, kdy je koncentrace léku nejnižší.

Přímé preparáty

U výtěrů z kožních lézí a ze zvukovodu se doporučuje přiložit i nenabarvený nátěr na podložním sklíčku pro hodnocení přítomnosti kvasinkovitých hub (tato informace je navíc uvedena ve výsledku).

Skladování a transport

Materiál pocházející z neaseptických částí těla, např. moč, stolice, výplachy TTW či BAL, je třeba skladovat při teplotě 4–8 °C, aby se zabránilo množení hub ve vzorku. Materiál by měl být v laboratoři zpracován do 24 hodin od odběru.

DERMATOFYTY

Materiál

  • chlupy / srst spolu s chlupovými folikuly
  • drápy
  • seškrab

Materiál je třeba odebrat na okraji postižených míst. Chlupy / srst se nesmí odebírat ze středu, protože zde nejrychleji probíhají procesy obnovy zdravého chlupu a nacházejí se zde odumřelé buňky houby. Materiál pro vyšetření dermatofytů se odebírá od pacientů před zahájením antifungální terapie nebo nejméně 4 týdny po ukončení léčby. Při používání systémových antifungálních léků je třeba zohlednit dobu potřebnou k eliminaci léku z organismu, která závisí na farmakokinetice daného preparátu.

Skladování a transport

Odebraný materiál je třeba umístit do sterilní, suché nádoby tak, aby se zabránilo kontaminaci mikroorganismy nebo environmentálními houbami.

Doporučuje se skladovat při pokojové teplotě a doručit do laboratoře nejpozději do 48 hodin.

Které vyšetření zvolit?

Kultivace PCR
Zjišťuje pouze živé dermatofyty – proto se doporučuje také pro kontrolu léčby. Zjišťuje i mrtvé dermatofyty.
Růst dermatofytů může být potlačen růstem plísní. Vyšší citlivost (plísně nemají vliv na výsledek).
Možnost detekce vzácných druhů dermatofytů. Zjišťuje nejdůležitější druhy (Trichophyton spp., Microsporum canis, Nannizia gypsea).
Nižší cena, ale delší doba čekání na výsledek (10–21 dní). Vyšší cena, ale výsledek do 3–7 dní.

Co znamená kontaminace?

Dermatofyty, jako Microsporum nebo Trichophyton, jsou keratinofilní vláknité houby, které se mimo jiné vyznačují pomalým růstem. Přestože se používají kultivační půdy, které mají za úkol potlačit růst plísní, stále existuje možnost smíšeného růstu hub jiných než dermatofytů. Takový růst naznačuje kontaminaci, při které nemusí být možné potvrdit nebo vyloučit přítomnost patogenních hub ve vzorku pomocí kultivační metody.

ASPERGILLUS SPP. (PLÍSŇOVÉ HOUBY)

Materiál

  • výtěr na půdě i bez půdy
  • výplachy dýchacích cest

Materiál pro vyšetření je třeba odebrat ze stejného místa pomocí dvou sterilních výtěrů navlhčených fyziologickým roztokem, z nichž jeden umístit do transportní půdy a druhý zaslat bez půdy.

Poznámky

Je třeba mít na paměti, že plísňové houby jsou široce rozšířeny v prostředí, proto se při kultivaci netypických plísní (jiných než Aspergillus) doporučuje opakovat vyšetření za účelem vyloučení náhodné mykobioty a potvrzení případného etiologického činitele.

Skladování a transport

Výplachy dýchacích cest je třeba uchovávat při teplotě 4–8 °C, aby se zabránilo množení hub ve vzorku. Materiál by měl být zpracován do 24 hodin od odběru.

POVRCHOVÉ MYKÓZY PLAZŮ

Kultivace

V rámci prováděného profilu se zohledňují jak plísňové houby, dermatofyty, tak kvasinkové houby. Je velmi důležité dodat k vyšetření dostatečné množství materiálu, které umožní založení kultivace pro všechny uvedené druhy. Je třeba mít na paměti, že vlhké prostředí, ve kterém žijí zvířata, způsobuje, že houby lze izolovat i od jedinců bez klinických příznaků, zejména se jedná o houby z rodů Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, Mucor, Trichosporon, Rhodotorula a Candida.

Materiál

  • výtěr v transportní půdě a seškrab

Je třeba vzít v úvahu, že některé houby izolované od plazů mohou vyžadovat další identifikaci formou sekvenování, proto se doba čekání například při podezření na Nannizzopsis guarroi / vriesii může prodloužit.

Další vyšetření

Metarhizium spp (PCR)

Materiál: mnohobuněčný výtěr

 

Nannizziopsis quarroi (PCR)

Materiál: mnohobuněčný stěr z kůže nebo orgánu

 

Ophidiomyces ophiodiicola (hadí druhy) (PCR)

Materiál: mnohobuněčný výtěr nebo kožní vzorek

MYKOLOGICKÁ DIAGNOSTIKA

Koně

KVASINKOVÉ HOUBY

Materiál

  • výtěr na agaru z nosu, oka
  • výplachy z průdušnice nebo dělohy
  • čerstvá stolice

Poznámky

Pro diagnostiku je nejvhodnější materiál odebraný před podáním léků, zejména těch s místním účinkem. Pokud již byla zahájena léčba, materiál je potřeba odebrat před podáním další dávky, kdy je koncentrace léku nejnižší.

Skladování a transport

Materiál pocházející ze vzorků z částí těla, které nejsou sterilní, např. moč, stolice, výplachy TTW nebo BAL, je nutné uchovávat při teplotě 4–8 °C, aby se zabránilo množení hub ve vzorku. Materiál by měl být zpracován do 24 hodin od odběru.

PLÍSŇOVÉ HOUBY

V rámci vyšetření jsou mimo jiné izolovány: Aspergillus spp., Penicillum spp., Mucor spp.,  Alternaria spp.

Materiál

  • výtěr na půdě i bez půdy
  • výplachy dýchacích cest nebo dělohy

Materiál k vyšetření je třeba odebrat ze stejného místa pomocí dvou sterilních výtěrů navlhčených fyziologickým roztokem, z nichž jeden se umístí do transportní půdy a druhý se odešle bez půdy. Vzhledem k možné kontaminaci plísňovými houbami se odběr stěru z kůže nedoporučuje.

Skladování a transport

Výplachy dýchacích cest je třeba uchovávat při teplotě 4–8 °C, aby se zabránilo množení hub ve vzorku. Materiál by měl být zpracován do 24 hodin od odběru.

DERMATOFYTY

Materiál

  • chlupy / srst s chlupovými folikuly
  • drápy
  • seškrab

Materiál je třeba odebrat na okraji lézí. Chlupy/ srst se nesmí odebírat ze středu, protože zde nejrychleji probíhají procesy obnovy zdravého chlupu a nacházejí se zde odumřelé buňky houby. Materiál k vyšetření dermatofytů se odebírá od pacientů před zahájením antimykotické terapie nebo nejméně 4 týdny po jejím ukončení. Při použití systémově působících antimykotik je nutné zohlednit dobu potřebnou k eliminaci léčiva z organismu, která závisí na farmakokinetice konkrétního přípravku.

Skladování a transport

Odebraný materiál je třeba umístit do sterilní, suché nádoby tak, aby se zabránilo kontaminaci mikroorganismy / environmentálními houbami.

Doporučujeme skladovat při pokojové teplotě a doručit do laboratoře nejpozději do 48 hodin.

Které vyšetření zvolit?

Kultivace PCR
Zjišťuje pouze živé dermatofyty – proto se doporučuje také ke kontrole léčby. Zjišťuje i mrtvé dermatofyty.
Růst dermatofytů může být potlačen růstem plísňových hub. Vyšší citlivost (plísně nemají vliv na výsledek vyšetření).
Možnost detekce vzácných druhů dermatofytů. Zjišťuje nejdůležitější druhy (Trichophyton spp., Microsporum canis, Nannizia gypsea).
Nižší cena, ale delší doba čekání na výsledek (10–21 dní). Vyšší cena, ale výsledek do 3–7 dní.

Co znamená kontaminace?

Dermatofyty, jako jsou Microsporum nebo Trichophyton, jsou keratinofilní vláknité houby, které se mimo jiné vyznačují pomalým růstem. Navzdory používání kultivačních půd, jejichž cílem je potlačit růst plísní, stále existuje možnost smíšeného růstu hub jiných než dermatofytů. Takový růst svědčí o kontaminaci, při níž nemusí být možné potvrdit ani vyloučit přítomnost patogenních hub ve vzorku kultivační metodou.